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微生物限度檢查儀操作流程

發(fā)布時(shí)間: 2024-04-19  點(diǎn)擊次數(shù): 656次

實(shí)驗(yàn)前:

  1.對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿的準(zhǔn)備:對(duì)玻璃器皿進(jìn)行清洗,將洗凈干燥的平皿、乳缽、刻度吸管等用牛皮紙包裹,放入鼓風(fēng)干燥箱中于160℃干熱滅菌2小時(shí)或放入高壓蒸汽滅菌柜于121℃濕熱滅菌30分鐘,備用。

  2.對(duì)實(shí)驗(yàn)用培養(yǎng)基及稀釋液的準(zhǔn)備:按規(guī)定比例配制實(shí)驗(yàn)所需的各種培養(yǎng)基及稀釋液,包好,放入高壓蒸汽滅菌柜于121℃濕熱滅菌30分鐘,備用。

  3.潔凈服的準(zhǔn)備:將當(dāng)天實(shí)驗(yàn)所用潔凈服放入高壓蒸汽滅菌柜于121℃濕熱滅菌30分鐘,備用。
實(shí)驗(yàn)中:

  1.將實(shí)驗(yàn)所需器皿、培養(yǎng)基、潔凈服、樣品、稀釋液放入相應(yīng)的傳遞窗中,打開紫外燈,照射30分鐘。

  2.打開潔凈室的通風(fēng)設(shè)備1小時(shí)以上,觀察潔凈室各個(gè)規(guī)定區(qū)域的壓差是否符合相應(yīng)規(guī)定范圍,若不符合,則應(yīng)通知設(shè)備部門及時(shí)進(jìn)行調(diào)整。

  3.進(jìn)入潔凈室,換上工作鞋,用洗手液洗手,烘干,換上潔凈服,戴上口罩、手套,并與噴手器下用75%乙醇或0.1%新潔爾滅對(duì)雙手進(jìn)行消毒。

  4.進(jìn)入萬(wàn)級(jí)潔凈走廊,觀察各個(gè)規(guī)定房間的溫度、濕度、壓差是否符合規(guī)定,并與傳遞窗中將經(jīng)紫外燈照射后的樣品、器皿稀釋液及培養(yǎng)基,放入相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)室(如微生物限度檢查室或無(wú)菌檢查室)。并將培養(yǎng)基的溫度控制在45℃以下(若培養(yǎng)基出現(xiàn)凝固現(xiàn)象時(shí),因微波爐加熱融化;若溫度太高時(shí),則應(yīng)用純化水降溫至不燙手背宜。
5.打開超凈工作臺(tái)的紫外燈,照射30分鐘,然后再打開超凈工作臺(tái)的通風(fēng)設(shè)備。用75%乙醇或0.1%新潔爾滅對(duì)實(shí)驗(yàn)所用工作臺(tái)面進(jìn)行擦拭消毒(消毒時(shí)應(yīng)遵循由里到外,由上到下,由潔凈要求高到潔凈要求低的原則)。

  6.按照適宜的次序于超凈工作臺(tái)內(nèi)擺放好稀釋液、天平、消毒液、集菌儀、剪刀、鑷子等物品,用75%酒精棉球進(jìn)行消毒,將樣品內(nèi)包裝表面用碘酒棉球以及75%酒精棉球依次進(jìn)行消毒。將營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板與超凈工作臺(tái)的左、中、右各置一個(gè)(平板需經(jīng)下預(yù)培養(yǎng)48小時(shí)且無(wú)菌生長(zhǎng)),開蓋暴露30min,測(cè)定的沉降菌每平板不得超過(guò)1cfu,則符合百級(jí)超凈工作臺(tái)的沉降菌標(biāo)準(zhǔn)(注:在潔凈工作臺(tái)進(jìn)行操作時(shí),為防止污染,應(yīng)用酒精棉球?qū)﹄p手反復(fù)消毒)。

  7.樣品處理(以采用離心薄膜過(guò)濾法為例): 用天平稱取規(guī)定量的樣品,置于乳缽中,碾碎,少量幾次加入規(guī)定量(用滅好菌的兩頭高量取)的稀釋液,研磨均勻,以制備供試液。8.細(xì)菌的檢查:用滅菌吸管吸取規(guī)定量的供試液于離心管中,500轉(zhuǎn)/秒,離心3分鐘。離心后用注射器吸取規(guī)定量的上清液于集菌儀中(集菌儀中的濾膜應(yīng)事先用少量的蛋白胨溶液進(jìn)行潤(rùn)洗),再用規(guī)定量的蛋白胨溶液進(jìn)行反復(fù)沖洗(每次沖洗量不得超過(guò)100ml,每張濾膜的總的沖洗量不得超過(guò)1000ml,且沖洗過(guò)程中應(yīng)該保持濾膜的完整性)。并用等量的蛋白胨溶液制備陰性對(duì)照的濾膜。

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