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固相萃取儀的常見故障

發(fā)布時(shí)間: 2023-12-20  點(diǎn)擊次數(shù): 394次

固相萃取儀的常見故障
固相萃取操作過程中經(jīng)常會(huì)遇到篩板堵塞、流速緩慢、凈化效果不理想、重現(xiàn)性差以及回收率不理想等問題,

1、篩板堵塞

常見的固相萃取柱通常由柱管、篩板和填料3部分組成,其中篩板是一種具有多孔結(jié)構(gòu)的材料,起到固定填料和過濾溶液的作用。

當(dāng)上樣液中含有較多顆粒雜質(zhì)時(shí),這些顆粒雜質(zhì)會(huì)在篩板上不斷聚集,固相萃取儀在篩板上端形成一層顆粒層,隨著壓力的增加以及時(shí)間的延長,顆粒層會(huì)越來越嚴(yán)實(shí),最終導(dǎo)致篩板堵死,溶液無法通過固相萃取柱。

遇到這種情況,可以在上樣前先高速離心或者過濾,然后取上清液或者濾液過固相萃取柱,減少顆粒雜質(zhì)的影響。

例如食品中人工合成著色劑的測定,當(dāng)樣品為飲料、配制酒等液體時(shí),過聚酰胺固相萃取柱或者G3垂融漏斗還是很輕松的,而當(dāng)樣品為糕點(diǎn)、谷物制品以及果凍時(shí),上樣前需先高速離心或者過濾,否則就很容易出現(xiàn)篩板堵塞的現(xiàn)象。

2、流速緩慢

固相萃取過程中流速不能太快,流速太快不利于目標(biāo)化合物在填料上的保留以及溶劑與目標(biāo)化合物或者填料的相互作用,從而影響保留或者洗脫過程。當(dāng)然流速也不能太慢,否則會(huì)大大延長前處理的時(shí)間。

固相萃取過程中導(dǎo)致流速緩慢的原因有:

(1)樣品粘度高,例如食品中遇到濃縮汁、糖果時(shí),需要對(duì)樣品充分稀釋,降低上樣液的濃度;

(2)填料較多或者太緊密,此時(shí)需要增強(qiáng)負(fù)壓或者減少填料的使用量;

(3)溶劑極性不匹配,例如SN/T1924-2011中淋洗固相萃取柱時(shí),先用水、甲醇,接著用正己烷淋洗,正己烷與前兩者的極性不同,從而導(dǎo)致流速很慢,遇到這種情況,可以增加負(fù)壓或者選用合適的溶劑進(jìn)行過渡。

3、凈化效果不理想

通常固相萃取柱有兩種凈化模式,一種是采用保留目標(biāo)化合物的模式,另一種是采用保留雜質(zhì)的模式,不管采用哪種模式都需要選擇合適的填料,使得目標(biāo)化合物或者雜質(zhì)能吸附在填料中,同時(shí)不需要保留的組分盡可能多的隨著溶劑一同流出固相萃取柱。

在保留化合物模式下凈化樣品時(shí),通常會(huì)經(jīng)歷上樣、淋洗和洗脫三個(gè)步驟。淋洗和洗脫溶劑選擇的不合適也會(huì)使得凈化效果不理想。
例如淋洗液洗脫強(qiáng)度太弱,淋洗時(shí)不能將雜質(zhì)淋洗掉,或者洗脫液的強(qiáng)度太強(qiáng),洗脫時(shí)將雜質(zhì)一并洗脫下來,這兩種情況均會(huì)導(dǎo)致凈化效果不理想。

由此可見,采用固相萃取柱凈化樣品時(shí),填料、淋洗液和洗脫液的選擇尤為重要。當(dāng)遇到一些復(fù)雜樣品,一種填料不能滿足凈化效果時(shí),可以選擇串聯(lián)固相萃取柱或者采用混合填料的方式進(jìn)行操作。

4、重現(xiàn)性差

固相萃取中重現(xiàn)性差通常與產(chǎn)品質(zhì)量、流速以及操作有關(guān)。固相萃取柱中填料的質(zhì)量、均勻性和松緊度都可能影響到方法的重現(xiàn)性,因此選擇質(zhì)量可靠的廠家很重要,遇到重現(xiàn)性差的實(shí)驗(yàn),可以選擇用標(biāo)準(zhǔn)溶液考察一下固相萃取柱的重現(xiàn)性。

固相萃取過程中流速的快慢也是影響重現(xiàn)性的重要因素之一,上樣、淋洗、洗脫過程中適當(dāng)降低流速,通常而言,流速低于5mL/min時(shí)結(jié)果較為穩(wěn)定,有些實(shí)驗(yàn)可能需要更慢的流速。當(dāng)然,操作者水平的高低也會(huì)影響到結(jié)果的重現(xiàn)性。

例如,通常上樣前需要活化固相萃取柱,上樣過程中不能讓填料干涸,濃縮過程不能有損失,復(fù)溶的時(shí)候需要充分溶解等等,這些都與操作技能息息相關(guān)。

5、回收率不理想

在實(shí)驗(yàn)中,操作者關(guān)注較多的可能也是關(guān)于加標(biāo)回收率的問題,固相萃取柱質(zhì)量的優(yōu)劣、固相萃取方法是否合適、操作者操作技能的高低都可以通過加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。原則上加標(biāo)回收率應(yīng)在80%~120%之間,當(dāng)然對(duì)于多組分目標(biāo)物同時(shí)檢測時(shí),這一指標(biāo)可適當(dāng)放寬。

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