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固相萃取儀在檢測(cè)食品中三聚氰胺檢測(cè)中的應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間: 2023-07-28  點(diǎn)擊次數(shù): 483次

三聚氰胺是一種重要的氮雜環(huán)有機(jī)化工原料,水溶液顯弱堿性,能溶于甲醇、乙酸等,微溶于水和乙醇,不溶于C4H10O、苯等,而且在傳統(tǒng)C-18柱上保留很 差。利用此特性,人們普遍采用離子對(duì)試劑液相色譜法和液質(zhì)聯(lián)用方法進(jìn)行檢測(cè)。但由于食品基質(zhì)復(fù)雜,使得樣品的處理甚關(guān)鍵。我們采用三酸提取,固相萃取小柱凈化,輔以固相萃取儀操作,建立一套快速、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性良好的樣品外理方法。
主要儀器與試劑
高效液相色譜儀、配四元梯度泵、在線真空脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、二極管陣列檢測(cè)器、固相萃取儀、超聲波清洗器、離心機(jī)、固相萃取小柱:OASIS MCX,6mL,500mg。三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品,純度99%。
樣品處理
提?。簻?zhǔn)確稱取經(jīng)粉碎混勻后樣品5.0g,加入50mL 1%三氯醋酸溶液及2 mL 2%乙酸鉛溶液,混勻后超聲提取30min,高速離心后取上清液待凈化。
凈化:將固相萃取小柱(6mL,500mg)置于固相萃取儀樣品架上,分別加入5mL甲醇、5mL水活化,再準(zhǔn)確移取5.0mL離心液上柱。活化及上 樣時(shí),將樣品架升至頂部通過調(diào)節(jié)面板旋鈕來(lái)調(diào)節(jié)N2氣流小,控制流速不超過1mL/min。然后再用5mL水、5mL甲醇洗滌SPE 柱,棄去洗脫液,將小柱升至頂部調(diào)節(jié)氣閥旋鈕自動(dòng)加壓吹干小柱,用5%氨水甲醇溶液5mL洗脫,收集洗脫液用氮吹儀吹干,用甲醇-水(2:8,V/V)定 容至1.0mL,過0.45μm濾膜,上機(jī)測(cè)定。
樣品提取與凈化
三氯醋酸具有沉淀乳及其制品中蛋白質(zhì)的作用,而且有助于三聚氰胺的溶解.由于三聚氰胺呈弱堿性。(弱陽(yáng)離子化合物),采用陽(yáng)離子交換柱進(jìn)行凈化可達(dá)到去除雜質(zhì),提高檢測(cè)靈敏度、重現(xiàn)性和回收率的效果。
固相萃取儀的應(yīng)用
固相萃取儀具有高效、簡(jiǎn)便的特點(diǎn)。它可通過該裝置中的氣流調(diào)節(jié)閥來(lái)控制小柱流速的大小,并可直接吹干小柱,每小柱在活化洗脫過程中具有良好的重現(xiàn) 性。并且可配套不同規(guī)格的固相萃取小柱(如1mL,3mL,6mL等)使用,一次操作可同時(shí)處理48個(gè)樣品。我們?cè)谀谭壑刑砑?2.0~50.0) ug/mL等不同濃度的三聚氰胺,進(jìn)行加標(biāo)回收和重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn),回收率在95~99%之間。相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于3%。
結(jié)論
固相萃取儀的加壓操作是通過在固相萃取小柱的上方施加壓力空氣或N2來(lái)實(shí)現(xiàn)。
這樣可加快過濾速度,控制柱子活化、淋洗、洗脫全過程的流速,使溶液易于進(jìn)入固定相孔隙,有利于樣液與固定相緊密接觸,從而提高萃取效果。它克服常規(guī) 的手動(dòng)固相萃取操作費(fèi)時(shí)、不能確保穩(wěn)定的流速、不同人員操作結(jié)果偏差較大的問題,通過簡(jiǎn)單的控制消除人為操作的誤差,在短時(shí)間內(nèi)同時(shí)處理幾十個(gè)樣品并具有良好的重現(xiàn)性。

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