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二氧化碳培養(yǎng)箱的常見污染

發(fā)布時(shí)間: 2022-03-03  點(diǎn)擊次數(shù): 705次

二氧化碳培養(yǎng)箱的常見污染

  混入二氧化碳培養(yǎng)箱(細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境)中,對(duì)細(xì)胞生存有害的成分和造成細(xì)胞不純的異物都應(yīng)視為污染。不同的污染物對(duì)細(xì)胞的影響也有差別,有的影響是長(zhǎng)期、緩慢和潛在的,而有的則能在很短的時(shí)間內(nèi)抑制細(xì)胞生長(zhǎng)或產(chǎn)生有毒物質(zhì)細(xì)胞。根據(jù)污染源不同主要可以分為:生物性污染、化學(xué)性污染、物理性污染和氣溶膠污染。

  1、生物性污染:

  這是常見也是危害大的污染。如細(xì)菌、病毒、真菌,支原體等。這些污染源有可能是人為帶入,或是細(xì)胞在放入二氧化碳培養(yǎng)箱前已經(jīng)受污染,再或者是箱體本身沒有消毒干凈。體外培養(yǎng)的細(xì)胞自身沒有抵抗污染的能力,而培養(yǎng)基中所加抗生素的抗微生物污染的能力也是有限的,因而細(xì)胞微生物污染一旦發(fā)生往往是無(wú)法挽救的。

  2、化學(xué)性污染:

  二氧化碳培養(yǎng)箱中許多化學(xué)物質(zhì)都可以引起細(xì)胞污染。如細(xì)胞培養(yǎng)容器清洗過程中殘留的洗滌劑、加濕器中未純化的水、人為帶入的液體或氣體都可能成為化學(xué)性污染的來源。不同化學(xué)物質(zhì)對(duì)細(xì)胞污染是不一樣的,有的可能促進(jìn)或抑制細(xì)胞生長(zhǎng),有的甚至殺死細(xì)胞。

  3、物理性污染:

  培養(yǎng)環(huán)境中的物理因素,如溫度、放射線、振動(dòng)、輻射(紫外線或熒光)會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生影響。物理性污染常常被人們所忽視或被籠統(tǒng)地歸為化學(xué)性污染,其主要是在代謝水平或分子水平上,影響細(xì)胞正常的生理過程。

  4、氣溶膠污染:

  氣溶膠是液體或固體微粒均勻地懸浮在氣體介質(zhì)中的分散體系,當(dāng)微粒是微生物時(shí),就是微生物氣溶膠,如果這種微生物是病原性的,就是病原微生物氣溶膠。細(xì)菌、病毒等病原體通過氣溶膠可在人與人、人與環(huán)境之間傳播。

二氧化碳培養(yǎng)箱污染防控措施

  1、二氧化碳培養(yǎng)箱的選擇:

  二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們?cè)O(shè)計(jì)了多種不同的裝置去減少和防止污染的發(fā)生,其主要是防污染設(shè)計(jì)和消毒滅菌系統(tǒng)的改進(jìn),以達(dá)到消毒滅菌的目的。如帶有紫外消毒功能的二氧化碳培養(yǎng)箱、帶HEPA過濾器的二氧化碳培養(yǎng)箱,以及帶高溫消毒的二氧化碳培養(yǎng)箱等,后者又分為高溫干熱和高溫濕熱兩類。這些裝置的滅菌能力各有千秋,紫外燈消毒范圍有限,距離燈越遠(yuǎn),消毒能力越差。

  HEPA過濾器的過濾膜孔徑有限,無(wú)法去除病毒和一些微小細(xì)菌,并且容易損耗,也有其局限性。相比而言,高溫消毒則是比較有效的方法。而高溫干熱和高溫濕熱也有所不同,由于蒸汽潛熱大、穿透力強(qiáng),容易使蛋白質(zhì)變性或凝固,因此高溫濕熱的滅菌效率比干熱滅菌法高。

  2、提高素質(zhì):

  人為因素和態(tài)度可以對(duì)環(huán)境、人和物起到一個(gè)正面或負(fù)面的影響。以安全為目的,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的工作人員應(yīng)明白自身的態(tài)度和人為因素對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境的重要性。因此,對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)行培訓(xùn)。

  3、重視管理:

  細(xì)胞室內(nèi)的二氧化碳培養(yǎng)箱應(yīng)由專人負(fù)責(zé)管理,定期對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行校正,至少每年一次。各項(xiàng)數(shù)值一旦固定后,不要隨意調(diào)節(jié),以免影響箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度的波動(dòng),降低機(jī)器的靈敏度,同時(shí)還會(huì)影響二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)的細(xì)胞生產(chǎn)狀態(tài)。

  使用前,對(duì)二氧化碳培養(yǎng)箱的各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行系統(tǒng)校正,并且對(duì)箱體和內(nèi)部進(jìn)行消毒處理,等各項(xiàng)數(shù)值穩(wěn)定一段時(shí)間后方可使用。一旦出現(xiàn)緊急問題,應(yīng)及時(shí)上報(bào),應(yīng)由專業(yè)的人員進(jìn)行操作,馬上采取應(yīng)對(duì)措施,以免造成不必要的損失。

  4、規(guī)范操作:

  二氧化碳培養(yǎng)箱的使用雖然很簡(jiǎn)單,但同樣需要規(guī)范操作。進(jìn)細(xì)胞室必須穿著實(shí)驗(yàn)服(白大褂),換上拖鞋或者穿一次性的鞋套。實(shí)驗(yàn)操作時(shí)必須帶一次性手套,特別是打開二氧化碳培養(yǎng)箱前,必須先用75%的酒精噴壺噴洗雙手再開二氧化碳培養(yǎng)箱,再取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板。顯微鏡下查看細(xì)胞培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板后,再放回二氧化碳培養(yǎng)箱時(shí),同樣也要噴酒精消毒。

  二氧化碳培養(yǎng)箱的兩個(gè)門開關(guān)取(放)物要迅速,不可長(zhǎng)時(shí)間開著,否則會(huì)影響CO2的濃度、溫度和濕度,以及造成污染。尤其是不要忘了關(guān)好里層的玻璃門。切記開門時(shí)不要對(duì)著二氧化碳培養(yǎng)箱說活,大口呼吸甚至是打噴嚏。

  5、加強(qiáng)防護(hù):

  如果實(shí)驗(yàn)人員生病而攜帶病菌,應(yīng)帶上口罩再進(jìn)細(xì)胞室,病情嚴(yán)重的則不宜進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。女性同志實(shí)驗(yàn)時(shí)頭發(fā)應(yīng)梳起,防止皮屑污染及連帶事件的發(fā)生。如果實(shí)驗(yàn)室條件允許,可以每人佩戴實(shí)驗(yàn)帽、手套和口罩,以防污染二氧化碳培養(yǎng)箱及對(duì)實(shí)驗(yàn)人員的自身的防護(hù)。

  6、注重保養(yǎng):

  二氧化碳培養(yǎng)箱置于細(xì)胞室中,室內(nèi)需保持干燥,環(huán)境溫度不能超過30℃(建議:18℃-30℃)。二氧化碳培養(yǎng)箱放置在遠(yuǎn)離門窗、供暖設(shè)備和空調(diào)導(dǎo)管的地方,不能被陽(yáng)光直接照射。二氧化碳培養(yǎng)箱的放置臺(tái)面必須水平避震且非易燃材質(zhì),不能靠在墻壁或類似的建筑物上,其后部接電處和墻壁至少保留30cm的空間。一旦放好不宜再移動(dòng)。

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