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實(shí)驗(yàn)室厭氧培養(yǎng)箱操作規(guī)程及注意事項(xiàng)

發(fā)布時(shí)間: 2019-11-15  點(diǎn)擊次數(shù): 1662次

(一)操作室厭氧環(huán)境形成:
1.按使用要求放置好必要的附件和器具;
2.通電源開照明燈,開溫控儀,調(diào)節(jié)所需溫度;
3.操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示紙(封閉);
4.關(guān)緊取樣室內(nèi)外門,并抽真空校驗(yàn);
5.操作室內(nèi)*次置換(氮?dú)庵脫Q):
A.把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊
B.接通氮?dú)膺M(jìn)氣路,打開氮?dú)饪刂崎y1,使手套鼓起,關(guān)閉閥門1,然后扎緊袋口;
6.操作室第二次置換(氮?dú)庵脫Q)重復(fù)一次充氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時(shí)用腳踏開關(guān)開閉排氣。如此連續(xù)三次氮?dú)庵脫Q。
7.操作室第四次置換(混合氣體置換):
(混合氣體配比為N2 85%、H2 10%、CO2 5%)
A.調(diào)換氣路打開混合氣閥3進(jìn)氣,充氣時(shí)取樣室先抽真空,并隨時(shí)用腳踏開關(guān)開閉排氣;
B.關(guān)掉混合氣體閥3,并打開閥5,使混合氣體經(jīng)過流量計(jì),調(diào)整流量計(jì),流量為每分鐘10ml左右;
C.混合氣體重復(fù)2-3次轉(zhuǎn)換,經(jīng)過上述過程,基本形成厭氧環(huán)境。
8.操作室內(nèi)打開粑粒除氧劑,接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧,一小時(shí)后打開美蘭指示紙觀察其變*況,不變色為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境;
9.開紫外線滅菌燈,室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理,滅菌時(shí)間按具體實(shí)驗(yàn)自定。
(二)菌種的置入和培養(yǎng):
1.檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊;
2.打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門;
3.取樣室充氮置換三次過程:打開真空泵,先抽真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后人工打開氮?dú)忾y2進(jìn)氣,使指針回復(fù)零位,關(guān)掉閥2。第二次重復(fù)操作一次。第三次操作時(shí),使真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后打開閥4進(jìn)混合氣,使指針回復(fù)零位,關(guān)掉閥4。取樣室充氮置換三次過程結(jié)束;
4.如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù);
5.取樣室外門開啟、關(guān)緊,再抽低真空度100ml汞柱(13kPa)檢驗(yàn);
6.厭氧培養(yǎng)箱需要長(zhǎng)期連續(xù)使用的條件:
A.每天在操作室內(nèi)打開美蘭指示紙觀察,如不正常就必須重新?lián)Q氣;
B.要長(zhǎng)期連續(xù)輸入微量的混合氣體,使補(bǔ)進(jìn)的氮?dú)饽芎臀⒘康难踅Y(jié)合通過催化吸收,保證室內(nèi)厭氧狀態(tài),補(bǔ)入混合氣流量選定為每分鐘10ml左右;
C.連續(xù)培養(yǎng)運(yùn)行一天,更換一次除氧劑和干燥劑。
D.操作室內(nèi)溫度可任意選擇和控制。
7.混合氣瓶、氮?dú)馄枯敵鰤毫φ{(diào)整:調(diào)節(jié)減壓閥,使輸出壓力0.1Mpa左右。
注意事項(xiàng)
1.儀器盡可能地安裝于空氣清凈、溫度變化較小的地方;
2.開機(jī)前應(yīng)全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說明,掌握正確使用方法;
3.培養(yǎng)物放入必須是在操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境后放入;
4.如發(fā)生故障(停氣等原因)操作室內(nèi)仍可保持10小時(shí)厭氧狀態(tài)(超過10小時(shí)則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理);
5.經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象;
6.調(diào)換氣瓶時(shí),注意要扎緊氣管,避免流入含氧氣體;
真空泵按要求使用,定期檢查加油.

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